Los mecanismos
moleculares del desarrollo del páncreas no son completamente conocidos, sin
embargo varios factores de diferenciación y factores transcripcionales han sido
identificados como cruciales para la organogénesis y diferenciación
pancreática, tal es el caso de Pax4 que se expresa en las etapas tempranas del
desarrollo pancreático, posteriormente es restringido a células β permaneciendo
así hasta la edad adulta.
Con este
conocimiento, es posible buscar, mediante métodos moleculares, mutaciones en
factores de transcripción clave para la diferenciación y regulación de células
pancreáticas que predisponen al desarrollo de diabetes mellitus tipo 2.
Ejemplo: Un
estudio realizado para evaluar molecularmente el gen Pax4 en 2 grupos de
estudio: 50 controles sanos y 50 pacientes con Diabetes mellitus 2 de inicio
temprano en población mexicana.
Muestra biológica:
Sangre periférica
Gen: PAX4
Extracción de
ADN:
A partir de
leucocitos de sangre periférica con técnicas estándar.
PCR:
Amplificación de
9 Exones de PAX4 mediante PCR con ADN genómico y oligonucleótidos
específicos.
SSCP:
Las diferencias
de corrimiento electroforético en la cadena simple del ADN, se evaluaron en
cada sujeto para detectar variantes de secuencia.
Secuenciación:
Cada patrón de
migración diferente detectado por SSCP, se secuenció en un secuenciador.
PCR-RFLP:
Las frecuencias
de las mutaciones encontradas se determinaron por PCR-RFLP
RESULTADOS:
El estudio
molecular del gen Pax4 reveló la presencia de dos variantes de secuencia en
población mestiza mexicana. Los polimorfismos R133W y P321H pueden ser parte
del fondo genético diabetogénico de dicha población.
BIBLIOGRAFÍA:
- Montúfar-Robles
I, Ortiz-López M, Menjívar-Iraheta M. Detección molecular de variantes de
secuencia del gen PAX4 en pacientes
con Diabetes mellitus tipo 2 de inicio temprano del Hospital Juárez de México.
Rev Med Grap Artem. 2006;31(7):69. Disponible en:
http://www.medigraphic.com/pdfs/bioquimia/bq-2006/bqs061h.pdf
http://www.medigraphic.com/pdfs/bioquimia/bq-2006/bqs061h.pdf
No hay comentarios:
Publicar un comentario